Durante a análise de vestígios biológicos por qPCR, o laboratório incluiu um controle negativo (sem DNA alvo) e observou fluorescência detectável apenas após o ciclo 38, próxima do limite de detecção

Question

Durante a análise de vestígios biológicos por qPCR, o laboratório incluiu um controle negativo (sem DNA alvo) e observou fluorescência detectável apenas após o ciclo 38, próxima do limite de detecção do equipamento. Assinale a opção que apresenta a explicação para esse resultado e a medida preventiva que deveria ser adotada, respectivamente.

Accepted Answer

Indica formação de dímeros de primers ou contaminação de baixo nível; deve-se otimizar os primers, adotar controle rigoroso de áreas e reagentes, e repetir a reação.

Answer

Indica que o DNA da amostra foi degradado; deve-se repetir a extração.

Answer

Demonstra que a sonda TaqMan falhou; deve-se substituir todos os reagentes fluorescentes.

Answer

Mostra que o DNA amplificado é de outra espécie; deve-se usar primers universais.

Answer

Indica que o PCR convencional seria mais confiável; deve-se trocar a técnica imediatamente.

Questão 14853 —

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